10 Марта 2015
Практические занятия к курсу "Электронная микроскопия нервной ткани"
Курс проводится для студентов 1-го курса магистратуры биологического факультета, 2 семестр, 2015 г. Руководитель: к.б.н., доцент Ткаченко Любовь Александровна. Регистрационный номер учебного плана: 14/5514/1. Номер проекта в электронной системе РЦ: 109-229.
Основной целью курса является формирование у студентов представлений о роли, значении и актуальности электронной микроскопии в биомедицинских исследованиях, о технике и возможностях электронномикроскопического анализа нервной ткани, практических навыков работы с аппаратурой и электронномикроскопическими изображениями. Основные задачи курса - дать студентам базовые сведения по просвечивающей электронной микроскопии, методологических подходах и возможностях электронномикроскопического анализа, подробное описание и практическое освоение методов фиксации и подготовки нервной ткани для последующего электронномикроскопического исследования, базовые навыки работы на просвечивающем электронном микроскопе (ПЭМ), интерпретация полученных электронномикроскопических изображений нервной ткани, исключение артефактов, возникающих при подготовке материала для ультраструктурного исследования.
Программа курса
06.03.2015 Заливка материала для ПЭМ. Техника безопасности. 8 часов. Оборудование РЦ: вытяжка, сухой термостат 60⁰, форма для заливки. Расходные материалы: смола 20 мл (эпон, отвердитель, пластификатор, катализатор), 4 осмий водный - 6 мл, уранил ацетат 2 водный - 10 мл.
13.03.2015 Основы ультрамикротомии: стеклянные ножи, подложки для сеток, устройство ультратома, заточка блока, полутонкие срезы. 4 часа. Оборудование РЦ: Ультрамикротом Leica EM UC7, Устройство для изготовления стеклянных ножей из полос толщиной до 10мм Leica EM KMR3, Станция для заточки полимеризованных блоков Leica EM TRIM2 . Расходные материалы: стекло для ножей 2 полосы, ванночки для ножа 6 шт, воск для крепления ножа, 1 водный толуидиновый синий - 1 мл, сеточки медные - 6 шт.
20.03.2015 Ультрамикротомия: ультратонкие срезы, контрастирование на сеточках. 4 часа. Оборудование РЦ: Ультрамикротом Leica EM UC7, Автоматизированная станция для контрастирование ультратонких срезов солями тяжёлых металлов Leica EM AC20. Уранилацетат перенасыщенный 70 -спиртовой раствор - 0,5 мл, цитрат свинца ( 0.2 водный щелочной рН=10 по Гилязову) - 0,5 мл. 03.04.2014 ( или 10.04.2014) Основы работы на ПЭМ, получение ЭМ изображений нервной ткани. 3 часа. Оборудование РЦ: Просвечивающий электронный микроскоп 40-120 кВ Jeol JEM-1400, пакет программ.